蛋白质等电点的名词解释 蛋白质的等电点名词解释生物化学
在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。
蛋白质等电点的测定方法:
方法:平板等电聚焦
原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不自是按照等电点不同被分离。
仪器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell
样品要求:
液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug
样品纯度>90%;含盐量<3 0mM;分子量:一般要求大于1000Da
常见影响测试情况:
1、蛋白质纯度不足
2、含盐量过高
3、蛋白质分子量太小,导致无法固定染色
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